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Título: Uso de la técnica SSCP para detectar mutaciones puntuales del ADN mitocondrial humano
Otros títulos: Use of the SSCP Technique to Detect Point Mutations on Human mtDNA
Autor: Estrada-Cuzcano, Alejandro
Sandoval Sandoval, José Raul
Guevara Fujita, María Luisa
Fujita, Ricardo
Temas: ADN mitocondrial
Mutación
Polimorfismo genético
Fecha de publicación: 2005
Lugar de publicación: Revista Peruana de Biología
Citación: Estrada A., Sandoval J., Guevara ML., Fujita R. Uso de la técnica SSCP para detectar mutaciones puntuales del ADN mitocondrial humano. Rev. peru. biol. 2005; 12(3): 349- 358
Citación: Rev. peru. biol. 12(3): 349- 358 (2005);Vol. 12, Num. 03
Resumen: Evalúa la técnica de SSCP (polimorfismo de conformación de cadena individual de ADN) para detectar mutaciones puntuales, tanto por su sensibilidad en la detección (alrededor 80% en condiciones ideales), como por su implementación fácil y económica. Se utilizaron como controles positivos y negativos, ADN de voluntarios caracterizados previamente para las mutaciones puntuales de 5 RFLPs mitocondriales. Para la optimización de la prueba fueron ensayadas concentraciones variables del tampón TBE (1X y 0,5X) y del glicerol (10%, 5% y 0) en geles de poliacrilamida. Cuatro de los 5 RFLPs fueron detectados en las condiciones utilizadas y pueden ser usados en estudios de rutina sin usar enzimas de restricción. Además, la técnica SSCP permitió determinar mutaciones desconocidas en un segmento de 394 nucleótidos de la región hipervariable (HVI) del ADNmt. Diferencias en correspondencia a los distintos haplotipos fueron detectados e incluso permitió discernir grupos dentro del mismo subtipo. La secuenciación de dos muestras del subtipo B1 con migración diferencial en SSCP, corroboró la existencia de siete nucleótidos distintos.
Descripción: La Revista Peruana de Biología es una publicación de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Identificador digital (URI): http://dx.doi.org/10.15381/rpb.v12i3.2410
http://www.repositorioacademico.usmp.edu.pe/handle/usmp/1514
ISSN: 1727-9933 (Digital)
1561-0837 (Impreso)
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